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    簡述液相色譜儀的廣泛應(yīng)用
    點(diǎn)擊次數(shù):3359 更新時間:2014-01-15 打印本頁面 返回

    一、醫(yī)藥方面

       ①分離分析藥物的組合含量:由于一種藥劑常含有多組分,色譜方法是既能分離又能定量的方法。如脂溶性維生素片,含有鉻維生素,有C18柱及含1%碳酸銨的甲醇為流動相。一次即可將各維生素B6、D1、A、E同時分離并定出含量。又如止痛藥或退燒藥也可用此法分離并測得各組分的含量。

      ②藥物生產(chǎn)中進(jìn)行中間控制:生產(chǎn)抗菌素時,首先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況。例如:青霉素、四環(huán)素、頭孢子菌素、紅霉素、柔紅霉素、慶大霉素等的發(fā)酵產(chǎn)物,均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動相或用離子對法,分析主體及其收產(chǎn)物的含量。

      ③分析藥物在體內(nèi)的殘量:這是近來研究新藥效能很主要的內(nèi)容之一,如冬凌草甲素是植物中的一組分,有抗癌效果,但是毒性大。測定其在血清中含量很重要,現(xiàn)在可用C18柱及甲醇水為流動相,測定處理后的血清樣品,即可得到血中的含量。如磺胺類藥品在血清及尿中含量也不允許太大,可用C18柱及酸性乙醇為流動相,測定含量后,則可估計(jì)zui合適的用藥劑量。又如四環(huán)素、巴比妥酸、止痛藥、退燒藥、護(hù)糖尿病的藥物等,在血或尿中的含量都可用C18柱用甲醇、水為流動相來測定含量。因此,反相色譜法應(yīng)用范圍極廣。 

      ④測定藥物在各種器官中的代謝產(chǎn)物,特別是研究藥物的代謝產(chǎn)物在血清中存在的情況。如測血清中的酮酸及戊二酸。測尿中代謝產(chǎn)物更為方便,不需要繁鎖的預(yù)處理。因?yàn)檠芯磕蛑械慕M分能鑒別病人的代謝功能,對病理研究或監(jiān)床診斷均具有重要的參考價值。

     

    二、天然產(chǎn)物組分分析方面

      天然物的組分非常復(fù)雜,如中草藥中各組分含量多少對藥劑作用影響很大。用此技術(shù)分離分析,具有簡便、快速的特點(diǎn)。氨基柱能分離分析天然物中糖的組分。氰基柱能分離中藥紫草及其衍生物的組成。硅膠柱能測定成藥中馬錢了堿、苦堿等含量。C18柱分離丹參中主要組分兒茶酚、桂皮中桂皮酸、煙草中的酚類化合物、麥角或中各種植物堿,這些都是近來日益受到重視的結(jié)果。

      該行業(yè)均有使用到液相(分析成分,含量),氣相(分析成分,含量,農(nóng)殘)及質(zhì)譜等儀器的潛力,但不同規(guī)模的企業(yè)對儀器的需求差別很大。目前國家沒有針對性的標(biāo)準(zhǔn),主要以國家標(biāo)準(zhǔn)(2010版)為參考。

     

    三、生化方面

      主要方向是分析嘌呤、嘧啶基的核甙或核甙酸及具有相應(yīng)的肽和蛋白質(zhì)。

      ①在細(xì)胞核中有種類繁多的甙及核甙酸,可用不同的檢測器或酶轉(zhuǎn)移檢測器或利用酶反應(yīng)進(jìn)行定性測定。用離子交換柱和緩沖游泳梯度淋洗。C18柱用含磷酸的緩沖水溶液的梯度淋洗法均能得到滿意的結(jié)果。

      ②分析核酸近年來有關(guān)分析核酸的研究很多,主要是分離RNA、DNA及碎片。現(xiàn)在使用硅烷化的硅藻土或長碳鏈季胺鹽涂漬=在上面制成系列填充柱。已能分離t-RNA,r-RNA及DNV碎片。有沒的緩沖液淋洗,還可利用此技術(shù)做RNA碎片的序列分離制備工具,對生物研究起了重要的作用。

      ③氨基酸、肽、蛋白質(zhì)的分析,氨基酸分析主要是制成熒光衍生物或酰氯的衍生物,然后測定其序列。近來也可用液相色譜的柱后衍生物法測定其序列。操作簡便、速度快、深受歡迎。用四烷基氯化胺肽形成離子對或凝膠色譜測定蛋白質(zhì),其分離效果也很好。

    (補(bǔ)充下:氨基酸用液相檢測,需用柱前衍生法和柱后衍生法來處理樣品,可參照《氨基酸色譜分離方法簡析》)

      ④酶的分析,酶是在血清及其他生理樣品中常有的反應(yīng)產(chǎn)物,化學(xué)分析法操作不便,易造成誤差,用色譜技術(shù)分析,具有操作簡便、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。如測定堿性或酸性磷酸酶的含量,測定反應(yīng)產(chǎn)物中腺甙脫 胺酶的含量等,目前對酶用色譜法分離分析的研究工作已開展很多。

      ⑤糖的分析,糖的分析是其它方法較難完成的。如把糖與硼酸緩沖液預(yù)選混合,使生成糖-硼酸絡(luò)合離子,再進(jìn)行分離。可把蔗乳糖、阿蘆糖、果糖、阿拉伯糖、巖藻糖、半乳糖、山梨糖、木糖、葡萄糖等幾十種,全部分開。也可用胺基柱分離各種天然產(chǎn)物中伯糖的各繃分。

     

    四、食品分析
      分析食品或動物飼料中的嘌維生素含量,是當(dāng)前食品工業(yè)中的重要課題。如今此技術(shù)已在分析咖啡中的黃嘌泠、調(diào)料中的核甙酸及核甙、果汁中的有機(jī)酸、米中的維生素、牛奶中的維生素D等都對食品營養(yǎng)價值提供有效數(shù)據(jù)。  

      分析食品中的有毒成分,如蘋果中農(nóng)藥萘乙酸、牛奶中的硝基呋喃腙、食品添加劑石臘油中的苯并芘、魚體中的有機(jī)汞等。

     

    五、環(huán)境分析

      主要針對大氣中污染的成分分析,廢水和汽車尾氣中有害組分的分析。如柴油機(jī)排出的顆粒,用有機(jī)溶劑溶解后,經(jīng)色譜分析結(jié)果,有多環(huán)芳烴的硝基物,這是對人體健康有很大潛在危險的化合物。又如藥廠排出的廢水中有大量硝酚、斯蒂芬酸;染料廠排出廢水中的苯胺等。用液相色譜分析簡便迅速。

     

    六、農(nóng)業(yè)分析

      農(nóng)業(yè)中需要對各種作物中的營養(yǎng)成分進(jìn)行各種含量分析。而液相色譜對多糖、脂肪酸蛋白質(zhì)等分析都是極為有效的方法,因此應(yīng)用頗為廣泛。

     

    七、高分子材料的分析 

      高分子工業(yè)材料及生物高分子分析是近年來新興的課題。凝膠色譜是分離分析高分子組成及鑒定其性能的方法。高分子材料中填充各種助劑、乳化劑、分散劑等物的分離,色譜技術(shù)也*特點(diǎn)。
      ①控制高分子產(chǎn)品質(zhì)量 在生產(chǎn)工藝中,可利用凝膠色譜測定聚合物小分子雜質(zhì)。如用凝膠色譜測定環(huán)氧樹脂中未聚合的雙酚A,用C18柱分離小分子環(huán)氧化合物,小分子聚苯乙烯或不能成膜的聚脂等,用以鑒定聚合物的質(zhì)量。
      ②測定聚合物的分子量分布寬度 分子量大小和分子量分布寬度是衡量聚合物質(zhì)量的一種重要指標(biāo),用凝膠色譜可以測定。
      ③高溫凝膠色譜測聚合物的老化、降解現(xiàn)象及分級。如測定聚乙烯分子量應(yīng)為四萬左右,通過分析可將分子量1000以下的聚乙烯蠟分開。還可用來觀察高密度聚乙烯的氧化過程,觀察聚苯乙烯、環(huán)氧樹脂、聚磺酸脂、尼龍及聚醚聚砜等的降解情況。
      ④測定高分子材料的適用性 日常食品的高分子材料包裝的很多,如果測定食品中有高分子材料,則說明這種高分子材料不適于做食品和包裝。

     

    八、無機(jī)分析

      自從有了離子交換柱后,液相色譜又有一個新分支——離子色譜。它能分析有機(jī)離子化合物,也能分析無機(jī)離子。特別是用在一般方法難以分離的陰離子,稀土元素,稀有元素等的分離方面。還可以制成金屬絡(luò)合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分離,較用萃取比色法測含量方便得多。是一種很有前途的分析方法。

     

     

    九、化工方面
      ①利用分析結(jié)果找*工藝條件 如抗氧劑對叔丁基酚,為烯烴與鄰苯二酚反應(yīng)而得,通過反復(fù)在工藝過程中對生成各組分的含量分析,可求得*反應(yīng)溫度及原料配比。可通過硅膠柱分析主體中所出現(xiàn)的雜質(zhì)求得催化劑的品種及其適當(dāng)?shù)臐舛取?/span>

      ②表面活性劑的分析 表面活性是工業(yè)產(chǎn)品中常用的一種原料,其純度與結(jié)構(gòu)應(yīng)用性能有密切關(guān)系,液相色譜的分離有*的效果。如C18柱及甲醇、水為流動相測定非離子表面活性劑時,可得到其純度、分子量大小及添加劑巰基苯并噻唑,也可分離聚乙二醇及吐溫系列物等。
      ③染料及其中間體的分析 染料中異構(gòu)物很多,大大影響了染料的色澤。通過分析,了解情況即可在工藝中采取有效措施。如磺酸類染料中間體,可用C18柱及含鹽甲醇為流動相分析。蒽醌類中間體用C18柱及甲醇、水系為流動相。苯胺系列用硅膠柱及含醇環(huán)已烷來分離等方法,都很有效。
      ④有機(jī)酸含量分析 沼氣發(fā)酵液、果汁、紅茶菌、油廠廢液等均含有各種有機(jī)酸,可用離子交換柱及緩沖液為流動相,都能得到好的分離效果。
      ⑤聚合物單體的質(zhì)量分析 如雙酚A是環(huán)氧樹脂、聚砜、聚碳酸脂的原料,其質(zhì)量的好壞與聚合物質(zhì)量有密切關(guān)系,其中以所含異丙烯基苯酚的含量影響zui壞,可須知硅膠柱及氯仿流動相分析其含量,然后在工藝中除去。各種醛、酮的二硝基苯腙衍生物,各種烷基酚,羥苛酷酚等均可用此法分離。

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